Kromatografia
Kromatografia on menetelmä, jossa käytetään sekoitettuja aineita ja joka riippuu niiden nopeudesta, jolla ne liikkuvat erityisten väliaineiden tai kemiallisten aineiden läpi. Se koostuu kiinteästä faasista (kiinteä aine) ja liikkuvasta faasista (neste tai kaasu). Liikkuva faasi virtaa pysyvän faasin läpi. Kromatografiaa käytetään paljon biokemiassa ja analyyttisessä kemiassa.
Tasokromatografia
Stationäärifaasi on tasainen taso, kuten paperi, tai aine lasilla.
Paperikromatografia
Paperikromatografia on tekniikka, jolla erotetaan ja tunnistetaan seoksia, jotka ovat (tai voivat olla) värillisiä. Se on suurelta osin korvattu ohutkerroskromatografialla, mutta se on edelleen tehokas opetusväline. Kaksisuuntaisessa paperikromatografiassa, jota kutsutaan myös "kaksiulotteiseksi kromatografiaksi", käytetään kahta liuotinta ja käännetään paperia 90° niiden välillä. Se on käyttökelpoinen eroteltaessa monimutkaisia seoksia, jotka koostuvat samankaltaisen polariteetin omaavista yhdisteistä, esimerkiksi aminohapoista. Alun perin käytetyt yhdisteet varmistavat, että tiedät, onko väri puhdas (vain yksi aine) vai seos (useita aineita).
Ohutkerroskromatografia
Ohutkerroskromatografia (TLCC) on yleinen laboratoriotekniikka, joka muistuttaa paperikromatografiaa. Paperisen stationäärifaasin sijasta siinä käytetään ohutta adsorbenttikerrosta, kuten silikageeliä, alumiinioksidia tai selluloosaa tasaisella alustalla. Paperikromatografiaan verrattuna sen etuna ovat nopeammat ajot, paremmat erotukset ja mahdollisuus valita eri adsorbenttien välillä. Vielä parempaa erotuskykyä ja kvantifiointia varten voidaan käyttää korkean erotuskyvyn TLC:tä.
Kromatografiapurkki
Pylväskromatografia
Pylväskromatografia erottaa yhdisteet käyttämällä monia kemiallisia toimia testattavan kemikaalin ja kromatografiakolonnin (sauva, johon on sekoitettu erityiskemikaaleja) välillä. Kolonnia käytetään joko painovoiman tai pumpun avulla.
Testattavaa sekoitettua ainetta lisätään pieni määrä, ja se hidastuu tietyn kemiallisen tai fysikaalisen toiminnan vaikutuksesta kromatografiakolonnissa olevien kemikaalien kanssa. Hidastuksen määrä riippuu testattavan aineen kemikaalityypistä ja eri faaseista. Aikaa, jolloin tietty kemikaali eluoituu (tulee ulos kolonnin päästä), kutsutaan "retentioajaksi", ja sitä ajatellaan olevan vain yksi yhdelle kemikaalille.
Kolonnikromatografian yleisin stationäärifaasi on silikageeli, jota seuraa alumiinioksidi. Aiemmin on käytetty myös selluloosajauhetta. Liikkuva faasi on joko puhdas liuotin tai liuottimien seos. Se valitaan siten, että liuottimen käyttöaika ja -määrä on mahdollisimman vähäinen, mutta samalla testattavat kemikaalit erotetaan selvästi toisistaan.
Korkean suorituskyvyn nestekromatografian tulokset
HPLC
Korkean suorituskyvyn nestekromatografiaa (HPLC) kutsutaan joskus myös korkeapainenestekromatografiaksi. Se on kolonnikromatografiaa, joka suoritetaan paineen alaisena prosessin nopeuttamiseksi.
HPLC:ssä käytettävät yleiset liuottimet ovat veden tai erilaisten orgaanisten nesteiden seoksia (yleisimmät ovat metanoli, etanoli tai asetonitriili).
Kysymyksiä ja vastauksia
K: Mitä on kromatografia?
V: Kromatografia on prosessi, jossa seoksen komponentit erotetaan toisistaan sen perusteella, kuinka nopeasti ne liikkuvat tiettyjen väliaineiden läpi.
K: Mitkä tekijät määräävät kromatografian tuloksen?
V: Kromatografian tulos riippuu siitä, kuinka nopeasti sekoitetut aineet liikkuvat erityisten väliaineiden tai kemiallisten aineiden läpi.
K: Mitkä kaksi vaihetta osallistuvat kromatografiaan?
V: Kromatografia koostuu stationäärifaasista (kiinteä aine) ja liikkuvasta faasista (neste tai kaasu).
K: Miten liikkuva faasi liikkuu kromatografiassa stationäärifaasin läpi?
V: Liikkuva faasi virtaa pysyvän faasin läpi.
K: Mitkä ovat tärkeimmät kromatografiaa käyttävät alat?
V: Kromatografiaa käytetään merkittävästi biokemiassa ja analyyttisessä kemiassa.
K: Mikä on kromatografian stationäärifaasi?
V: Kromatografiassa stationäärifaasilla tarkoitetaan kiinteää ainetta, joka on vuorovaikutuksessa seoksen komponenttien kanssa ja saa ne hidastumaan tai pysähtymään.
K: Mikä on liikkuva faasi kromatografiassa?
V: Kromatografiassa liikkuvalla faasilla tarkoitetaan nestettä tai kaasua, joka virtaa pysyvän faasin läpi ja kuljettaa seoksen komponentteja eri nopeuksilla.
