Dna-Konstruktio
DNA-konstruktio on keinotekoisesti rakennettu nukleiinihapon segmentti, joka "siirretään" kohdekudokseen tai -soluun.
Se sisältää usein DNA-insertin, joka sisältää kiinnostavaa proteiinia koodaavan geenisekvenssin. DNA-insertti on subklonoitu molekyylibiologiseen vektoriin.
DNA-konstruktio voi ilmentää villityyppistä proteiinia tai estää tiettyjen geenien ilmentymisen ilmentämällä kilpailijoita tai inhibiittoreita. Se voi ilmentää mutanttiproteiineja, kuten deletio- tai missense-mutaatioita. DNA-konstruktiota käytetään usein molekyylibiologiassa makromolekyylien, kuten proteiinien tai RNA:n, tarkempaan analysointiin.
Molekyylibiologiset vektorit
Molekyylibiologinen vektori on DNA-molekyyli, jota käytetään välineenä vieraan geneettisen materiaalin siirtämiseksi toiseen soluun.
Tärkeimmät vektorityypit ovat plasmidit, bakteriofagit ja muut virukset sekä keinotekoiset kromosomit. Yhteistä kaikille muunnetuille vektoreille on replikaation alkuperä, monikloonauspaikka ja valikoiva merkkiaine.
Itse vektori on yleensä DNA-sekvenssi, joka koostuu insertistä (siirtogeenistä) ja suuremmasta sekvenssistä, joka toimii vektorin "selkärankana". Selkäranka sisältää bakteeriresistenssigeenejä bakteerien kasvua varten ja promoottoreita organismin ilmentymistä varten.
Geneettistä tietoa toiseen soluun siirtävän vektorin tarkoituksena on yleensä eristää, monistaa tai ilmentää insertti kohdesolussa.
Vektorin lisäämistä kohdesoluun kutsutaan yleensä transformaatioksi bakteerisolujen osalta tai transfektioksi eukaryoottisolujen osalta. Virusvektorin asettamista kutsutaan usein transduktioksi.
Plasmidien integroituminen isäntäbakteeriin tapahtuu kahdella eri tavalla: Integroitumattomat plasmidit replikoituvat kuten ylemmässä esimerkissä, kun taas episomit, alempi esimerkki, integroituvat isäntäkromosomiin.
Kysymyksiä ja vastauksia
Q: Mikä on DNA-konstruktio?
A: DNA-konstruktio on nukleiinihapon segmentti, joka on keinotekoisesti rakennettu siirrettäväksi kohdekudokseen tai -soluun.
K: Mitä DNA-konstruktio usein sisältää?
V: DNA-konstruktio sisältää usein DNA-insertin, joka sisältää kiinnostavan proteiinin geenisekvenssin.
K: Mikä on molekyylibiologinen vektori?
V: Molekyylibiologinen vektori on väline, jota käytetään DNA-fragmenttien siirtämiseen solusta toiseen.
K: Miten DNA-konstruktio voi estää tiettyjen geenien ilmentymisen?
V: DNA-konstruktio voi ilmentää kilpailijoita tai inhibiittoreita, jotka estävät tiettyjen geenien ilmentymisen.
K: Minkälaisia mutanttisia proteiineja DNA-konstruktio saattaa ilmentää?
V: DNA-konstruktio voi ilmentää mutanttiproteiineja, kuten deletio- tai missense-mutaatioita.
K: Mikä on DNA-konstruktion käyttötarkoitus molekyylibiologiassa?
V: DNA-konstruktiota käytetään molekyylibiologiassa, jotta makromolekyylejä, kuten proteiineja tai RNA:ta, voidaan analysoida tarkemmin.
K: Millaisia proteiineja DNA-konstruktio voi ilmentää?
V: DNA-konstruktio voi ilmentää villityyppiproteiinia, mutanttiproteiineja tai kilpailijoita/estäjiä.
