Ohutkerroskromatografia
Ohutkerroskromatografia (tai TLC) on menetelmä, jolla seokset erotetaan niiden yksittäisiin komponentteihin.
TLC suoritetaan TLC-levyllä. Nämä levyt koostuvat piidioksidikerroksesta, ja niiden takana on yleensä ohut lasipala, mutta myös muita materiaaleja, kuten muovia, voidaan käyttää. TLC-levyn etupuolella olevaa piidioksidipinnoitetta kutsutaan pysyväksi faasiksi.
TLC:n suorittaminen
TLC-kokeen suorittaminen aloitetaan sijoittamalla pieni pisara nestemäistä analyyttiä lähelle TLC-levyn pohjaa. Tätä kutsutaan TLC-levyn "täplittämiseksi". Pilkkuina käytetään yleisesti hyvin ohuita lasiputkia.
Kun levy on havaittu, se asetetaan lasiastiaan, jossa on pieni määrä liuotinta. Tätä liuotinta kutsutaan liikkuvaksi faasiksi. On tärkeää, että liuottimen korkeus on sen korkeuden alapuolella, jolla yhdiste on täplikäsitelty levylle. Kun liuotin liikkuu TLC-levyllä kapillaarisesti ylöspäin, myös yhdiste liikkuu. Yhdiste erotetaan komponenteiksi sen perusteella, miten kukin komponentti vetää puoleensa stationäärifaasia ja liikkuvaa faasia. Komponentit, joita liikkuva faasi vetää puoleensa enemmän kuin stationäärifaasi, liikkuvat pylväässä pidemmälle ylöspäin. Vetovoimat perustuvat polariteettieroihin.
TLC-levy on poistettava ennen kuin liuotin saavuttaa levyn yläosan. Erotetut yhdisteet ovat joskus värillisiä, mutta analyysi vaatii usein lisätyötä. Monet yhdisteet valaistuvat, kun TLC-levy asetetaan ultraviolettilampun alle. TLC-levyjä kastetaan usein myös väriaineisiin (kuten anisaldehydiin, kaliumpermanganaattiin tai jodiin), jotta yhdiste saataisiin näkymään levyllä.
Sovellus
Orgaaniset kemistit käyttävät TLC:tä yleisesti reaktioiden etenemisen seurantaan. Lähtöaineen ja tuotteiden läsnäoloa voidaan seurata yhdellä TLC-levyllä.
TLC-kokeen tulosten perusteella suurempi määrä seosta voidaan erottaa toisella tekniikalla (kuten kolonnikromatografialla) käyttäen samanlaista liuotinjärjestelmää. Tai TLC-koe voidaan toistaa käyttäen eri liuotinta. Myös liuottimien seoksia voidaan käyttää. Eri liuottimien käyttö vaikuttaa siihen, miten hyvin yksittäiset komponentit erottuvat TLC-levyllä.
